REV7基因对人结肠癌细胞周期及凋亡的影响

目的 探讨下调REV7基因对人结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期及凋亡的影响.方法 通过体外培养人结肠癌细胞株HCT116、SW620,用REV7基因的特异性siRNA片段转染细胞,运用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测转染后细胞系的REV7基因干扰效率.选择REV7低表达具有统计学意义的上述细胞系作为实验组细胞,同时将加入转染试剂的HCT116、SW620细胞作为空白对照组,转染阴性RNA oligo干扰片段的HCT116、SW620细胞作为阴性对照组.采用流式细胞术测定各组细胞的细胞凋亡情况.通过Western blot法检测各组细胞抑癌蛋白P53、细胞周期蛋白P21、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、细胞凋亡蛋白BAK、BCL-XL表达水平.结果 实时荧光定量PCR结果显示,HCT116、SW620细胞中siREV7干扰效率均高于60％(P<0.01);Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡结果显示,实验组与阴性对照相比,REV7下调促进HCT116、SW620细胞凋亡(P<0.05);Western blot结果显示,低表达REV7可下调HCT116、SW620细胞抗凋亡蛋白BCL-XL、细胞周期蛋白P21蛋白表达水平(P<0.01),上调促凋亡蛋白BAK、肿瘤抑制蛋白P53、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4蛋白表达水平(P<0.01).结论 下调REV7可以阻滞结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期并促进细胞凋亡,其机制可能与下调REV7后,引起抑癌蛋白P53、蛋白细胞周期蛋白CDK4、P21及细胞凋亡蛋白的BAK、BCL-XL的表达变化有关.