羊布鲁菌外膜蛋白31诱导不同时间对小胶质细胞自噬的影响

目的 确定羊布鲁菌外膜蛋白31(Omp31)引起小胶质细胞(BV-2细胞)明显自噬的时间,为进一步研究自噬与炎症的关系提供实验依据.方法 用0.5 μ.g·mL-1的Omp31分别处理BV-2细胞0、6、12和24 h,收集细胞和上清液;采用透射电镜技术观察各组细胞自噬体;用RT-qPCR技术检测LC3B mRNA的表达;用Western blot法检测兔抗小鼠微管相关蛋白轻链3B(LC3B)Ⅱ蛋白的表达;ELISA法分别检测上清液中TNF-α、IL-6和IL-10的表达量.结果 0.5 μg·mL-1 Omp31处理细胞6h能形成较多自噬体,促进LC3B mRNA表达,且能明显增加LC3BⅡ蛋白的表达量;而处理细胞12、24 h则抑制LC3B mRNA表达;0.5 μg·mL-1 Omp31能诱导BV-2细胞表达TNF-α、IL-6,且具有时间依赖性,但对IL-10的表达有抑制作用.结论 0.5 μg·mL-1 Omp31处理BV-2细胞6h能诱导小胶质细胞发生明显自噬.