胺丁羟磷酸盐抑制皮肤角质形成细胞的增殖作用

目的 探讨胺丁羟磷酸盐(ALD)对皮肤角质形成细胞(KCs)增殖的影响及中间产物是否拮抗其影响.方法 一定浓度的ALD、甲羟戊酸(MVA)、胆固醇(CH)、法尼基焦磷酸(FPP)、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)单独或联合处理KCs,细胞活力测定实验(MTS)法分析各处理组对KCs细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测各加药组对细胞周期的影响;Western blot分析各加药组对细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、Cyclin E和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂(P21)及磷酸化的蛋白激酶B (pAKT)和磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)表达量的影响.结果 MTS实验表明ALD对KCs增殖有显著抑制作用,而上游产物MVA与其有协同效应;下游产物中仅CH有部分补救作用.流式细胞术检测结果显示KCs被ALD阻滞在细胞分裂间期G1期,而仅CH可减弱ALD导致的G1期阻滞.Western blot结果表明ALD显著下调Cyclin B1,同时上调Cyclin E和P21的表达.此外,ALD能促进磷脂酰基酶3-激酶-蛋白激酶B(P13K-AKT)信号通路,抑制丝裂原激活蛋白激酶-胞外信号调节激酶(MAPKS-ERK1/2)信号通路的激活.结论 ALD显著抑制原代KCs的增殖,CH对这种抑制有部分的补救作用.