PDGFRα下游新底物CCT2对肿瘤细胞生长的影响及其机制

目的·研究血小板源性生长因子受体α (platelet derived growth factor receptorα,PDGFRα)的下游新靶点分子伴侣复合体β亚基(chaperonin containing TCP1 subunit 2,CCT2)对肿瘤细胞生长的影响及其机制.方法·选取非小细胞肺癌细胞系H1703作为细胞模型.采用Western blotting方法检测H1703细胞在PDGFRα抑制剂Gleevec处理以及PDGF刺激条件下CCT2的磷酸化;将H1703细胞分为对照组(siCon组)、siPDGFRα组和siCCT2组,分别转染siRNA,待48 h后对细胞进行计数;将H1703细胞分为对照组(siCon组)、siPDGFRα组、siAKT组和siCCT2组,采用Western blotting方法检测4组细胞中PDGFRα和PARP蛋白水平;采用细胞组分分离方法检测CCT2在H1703细胞中的定位,通过免疫共沉淀方法检测CCT2与PDGFRα的相互作用.结果·Gleevec抑制CCT2的磷酸化,PDGF诱导CCT2磷酸化;与对照组比较,siCCT2转染的细胞数量降低了约30％ (P=0.006);与对照组比较,siCCT2转染的细胞中PDGFRα蛋白表达量减少,PARP切割增加;CCT2在细胞膜类组分和细胞质中都有分布,并可以与PDGFRα相互作用.结论·PDGFRα下游新靶点CCT2通过与PDGFPα相互作用,维持PDGFRα蛋白稳定性,从而促进H1703细胞生长.