过表达受体活性修饰蛋白-1对人气道平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences)(2019)

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摘要
目的:探讨过表达受体活性修饰蛋白-1(RAMP)对人气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和细胞周期的影响及机制.方法:从人正常肺叶支气管分离出ASMCs,取第3~8代细胞,转染重组pcDNA3.1-RAMP-1,同时将转染pcDNA3.1空载体的细胞作对照,并设置空白组.转染48 h后,Western blot检测RAMP-1、IκBα、p65NF-κB、PCNA和CyclinD1蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期.CCK-8法检测转染24、48和72 h后细胞增殖情况.结果:pcD-NA3.1-RAMP-1组ASMCs中RAMP-1蛋白表达明显高于空白组(P<0.05).与空白组和pcDNA3.1组比较,pcD-NA3.1-RAMP-1组细胞增殖降低,G0/G1期细胞比例升高,而S期和G2/M期细胞比例降低,IκBα蛋白表达升高,p65NF-κB、PCNA和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05).结论:RAMP-1可抑制人ASMCs增殖,阻滞细胞周期进程,机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.
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