转染DNMT1 siRNA对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的影响

目的:探讨以siRNA干扰DNA甲基转移酶1(DNMT1)表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot检测体外培养的正常皮肤细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞中DNMT1 mRNA和蛋白的表达情况.培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别转染阴性对照siRNA和DNMT1 siRNA,以不做任何处理的细胞为对照,MTT法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot检测细胞中DNMT1蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中DNMT1、PCNA、Bcl-2、Bax和TGF-β1 mRNA的表达情况.结果:DNMT1 mRNA和蛋白在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达水平较正常皮肤细胞升高(P<0.05).转染DNMT1 siRNA后细胞的增殖能力减弱,凋亡增强,且DNMT1蛋白和DNMT1、PCNA、Bcl-2和TGF-β1 mRNA表达水平均降低,而Bax mRNA表达水平升高(P<0.05).结论:DNMT1在瘢痕疙瘩成纤维细胞中高表达,干扰其表达能够明显抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调Bax和下调PCNA、Bcl-2、TGF-β1表达有关.