携带质粒的PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及细胞相容性研究

ACTA MEDICINAE UNIVERSITATIS SCIENTIAE ET TECHNOLOGIAE HUAZHONG(2013)

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摘要
目的 构建携带tPA基因质粒的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒-超声微泡复合体,检测其理化性质、体外缓释方式、细胞相容性.方法 应用双次乳化法制备携有tPA基因质粒的PLGA纳米粒;应用薄膜水化超声法制备阳离子超声微泡;两者通过静电吸附作用,形成质粒-纳米粒-超声微泡复合体(plasmid encapsulated nanoparticle-microbubble complex,PENMC).检测PLGA纳米粒的质粒载量,该复合体PENMC的质粒载量;检测PLGA纳米粒及复合体体外缓释质粒的情况;CCK-8法检测纳米粒及复合体PENMC的细胞毒性.结果 检测携带质粒的纳米粒粒径为(217.2±2.2)nm,zeta电位为(-15.24±0.83)mV.微泡平均大小为(3.2±1.5)μm,zeta电位为(13.66±2.05)mV.微泡浓度为(4.3±1.1)×108/mL.PENMC平均直径为(4.6±1.7)μm,zeta电位为(2.23±1.45)mV.浓度为(3.0±1.3)×108/mL.1 mg PLGA纳米粒载有质粒(42.3±2.1)μg.1 mL PENMC中带有质粒(20.5±2.7)μg.PLGA纳米粒及复合体PENMC前7 d累计释放量均为(57±3)%.起始段短时间内快速释放,后呈现稳定、缓慢释放.体外细胞毒实验证实PLGA纳米粒及复合体PENMC均未见明显细胞毒性效应.结论 所构建的纳米粒-超声微泡复合体显示出较好的缓释效果,较低的细胞毒性,为后续将其应用于基因治疗奠定了实验基础.
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