联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞增殖和形态的影响

目的探索体外培养和扩增同一来源内皮细胞和平滑肌细胞的有效方法,研究联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞形态和增殖的影响.为研究内皮细胞和平滑肌细胞相互关系和体外构建组织工程血管提供理论和实践基础.方法在体外用酶消化法和组织块贴壁法分别建立内皮细胞和平滑肌细胞的原代,并应用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸钠传代培养.应用光镜、透射电镜、细胞计数和MTT法对内皮细胞和平滑肌细胞的形态和代谢进行研究.模拟血管壁的内层结构及内皮细胞和平滑肌细胞间的相互影响途径,建立以聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜为介质的内皮细胞与平滑肌细胞联合培养模型.分3组:内皮细胞/平滑肌细胞、平滑肌细胞/平滑肌细胞和空白/平滑肌细胞,应用3H-TdR掺入法研究联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞增殖的影响.结果酶消化法和植块培养法可以有效地建立起内皮细胞和平滑肌细胞的原代.内皮细胞对联合培养的平滑肌细胞早期增殖有促进作用,晚期则增殖缓慢.结论以PET膜为介炙联合培养同一来源的内皮细胞和平滑肌细胞的新模型是研究两者间相互影响的良好模型.内皮细胞和平滑肌细胞作为血管构成的基本细胞,对于它们的形态学、体外培养和扩增以及相互关系的研究具有重要的意义.