脂多糖促进H2O2降低羧酸酯酶1/2活性抑制肝癌HepG2细胞存活

目的 阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理.研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响.方法 MTT检测不同剂量LPS (0mg/L,1.0mg/L,3.0mg/L,5.0mg/L,10.0mg/L)与H2O2 (0.5mm)分别处理或共孵育12h,24h,48h对细胞增殖的影响.采用Tunel技术检测LPS对细胞凋亡的影响.酶学测定LPS对HepG2细胞中HCEs酶活性的影响.采用Real-time PCR和Western blot检测HepG2细胞中CES1、CES2在mRNA水平和蛋白水平变化.结果 LPS和H2O2 (0.5mm)单独处理对HepG2细胞增殖和凋亡无显著影响.LPS与H2O2(O.5mm)共孵育剂量依赖性的降低HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,降低HCEs酶活性.此外,LPS和H2O2(0.5mm)共孵育可明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的mRNA和蛋白水平的表达,降低趋势呈现剂量-效应关系.结论 我们发现LPS和H2O2(0.5mm)共孵育能够显著降低细胞增殖,促进细胞凋亡.此机制可能与LPS明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的表达和活性有关.提示肝肿瘤细胞在炎症状态下,羧酸酯酶对药物代谢的能力下降.本研究为临床肝癌治疗提供新的理论依据和治疗靶点.