人源化抗PSMA单链抗体的筛选与鉴定

目的 利用全人单链可变区噬菌体抗体库筛选与前列腺特异性膜抗原(PSMA)特异性结合的全人单链抗体.方法 利用PSMA重组抗原在全人单链可变区噬菌体抗体库进行富集筛选.阳性克隆用phage ELISA和Western-Blot鉴定.结果 经4轮筛选,每轮筛选抗体库的出入库比不断提高,表明每轮库中的阳性克隆得到富集.从第4轮筛选出库的平皿中挑取30个菌落克隆,诱导噬菌体.phage ELISA检测获得3株阳性克隆.3个阳性克隆经过测序比对,核酸序列基本一致.Western-Blot鉴定结果显示,筛选出的单链抗体能与PSMA重组蛋白特异性结合.结论 成功从全人源单链抗体库中筛选出具有结合PSMA抗原的特异性的人源化单链抗体,从而为前列腺癌的靶向诊断和治疗奠定了基础.