心脏特异性lncRNA-uc.167转基因小鼠的构建与表型分析

目的:构建lncRNA-uc.167心肌组织特异性转基因小鼠并对其进行表型分析.方法:采用SfiⅠ、Asc Ⅰ双酶切载体质粒pRP.ExSi-Isl1和目的片段uc 167-pMD18(R)-T质粒,回收连接,从而把uc.167基因克隆入心肌组织特异表达的Isl启动子的下游,构建转基因表达载体,将所得载体线性化后,通过显微注射法建立uc.167转基因小鼠,并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型.通过心脏组织学和超声检查对转基因小鼠的表型进行了初步分析.结果:成功构建uc.167转基因小鼠;超声心动图显示转基因小鼠心脏结构及相关功能指标均未见明显异常;心脏重量指数也无明显改变;HE染色提示心室大小和室壁厚度均无显著性差异,心肌细胞大小也无明显改变,且未见炎症浸润、细胞水肿等异常现象;Masson染色表明转基因阳性和同窝阴性小鼠均未出现明显的心肌纤维化改变.结论:uc.167转基因小鼠并未出现明显的心脏发育畸形,心脏结构与功能也未见明显异常.