激活态雪旺细胞对神经干细胞分化作用的研究

目的 探讨激活态雪旺细胞(SCs)对神经干细胞(NSCs)的分化作用.方法 取出生24h内的SD乳鼠脊髓NSCs,分离培养并传至4代.取体重(100±5)g的SD大鼠,结扎右侧坐骨神经,1周后取双侧坐骨神经,左侧提取正常坐骨神经分离培养SCs(普通SCs),右侧提取结扎变性的坐骨神经分离培养SCs(激活态SCs),均采用双酶消化加差速贴壁法.将SCs与NSCs应用Transwell培养皿联合培养,分为三组:A组为激活态SCs与NSCs;B组为普通SCs与NSCs;C组仅为NSCs.于培养的第2、4、6天检测各组NSCs活性.1周后,Western blot检测各组SCs表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平,免疫荧光检测各组NSCs分化比例.结果 传至4代的NSCs生长稳定,分离的SCs 7 d后大量增殖呈旋涡状.联合培养后MTT法检测细胞活性,第2、4天三组细胞的活性差异无统计学意义(P＞0.05),第6天C组活细胞比例开始降低,A、B组与C组比较差异有统计学意义(P＜0.05),A组与B组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot检测A组细胞表皮生长因子(EGF)表达水平(0.486±0.028)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平(0.385±0.023)均高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).MAP-2荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(35.26±2.53)％]高于B组[(27.63±3.45)％],差异有统计学意义(P＜ 0.05);GFAP荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(62.42±3.78)％]低于B组[(70.18±1.26)％],差异有统计学意义(P＜ 0.05).结论 激活态SCs能够促进NSCs向神经元的分化进程,提高神经元的分化比例.