ATF4在CCl4和LPS/D-GalN介导小鼠肝损伤中的保护作用

目的 利用小鼠模型对转录激活因子4(ATF4)在肝损伤中的作用进行研究.方法 建立CCl 4慢性肝损伤小鼠模型和LPS/D-GalN急性肝损伤小鼠模型,运用逆转录PCR和Western blot分析比较损伤模型中小鼠肝脏、心脏、肾脏、肺脏组织中的ATF4蛋白及其mRNA水平.采用CRISPR-Cas9技术敲低ATF4后,分析检测两种模型中小鼠血清AST和ALT水平.为进一步探明ATF4的作用,采用内质网应激诱导剂衣霉素处理小鼠,Western blot检测小鼠肝、肺组织中ATF4、磷酸化-eIF2α、总eIF2α和Bip的蛋白水平.RT-PCR检测肝脏XBP1 mRNA的剪接形式(活性形式)和未剪接形式(非活性形式).结果 小鼠肝脏中的ATF4蛋白与其他组织相比异常增高.衣霉素能诱导小鼠体内内质网应激反应(如eIF 2α磷酸化),却引起小鼠肝脏中ATF4蛋白降低.在CCl4慢性肝损伤模型和LPS/D-GalN急性肝损伤小鼠模型中,肝脏ATF4蛋白明显降低.CRISPR-Cas9敲低肝脏ATF4后,两种小鼠模型中的血清AST和ALT进一步升高.结论 ATF4在小鼠肝损伤中起保护作用.