人脐带间充质干细胞条件培养液对Aβ损伤原代海马神经元凋亡的影响

目的 探讨人脐带间充质干细胞条件培养液(human umbilical cord mesenchymal stem cells conditioned medium,hUCMSCsCM)对体外培养的Aβ(Amyloid β,β-样淀粉蛋白)损伤海马神经元凋亡的影响.方法 分离、培养人脐带间充质干细胞,第3~4代的细胞用于收集条件培养液;分离、培养大鼠海马神经元,培养7~8d的神经元用于实验分为hUCMSCsCM对神经元细胞活力的影响:分为溶剂对照组、Aβ损伤组、Aβ+hUCMSCsCM低剂量组、Aβ+hUCMSCsCM中剂量组、Aβ+hUCMSCsCM高剂量组.通过MTT检测神经元活力;通过DAPI染色观察5组神经元凋亡情况;通过Western Blot分析神经元cyt-c蛋白水平.结果 与溶剂对照组相比,Aβ可降低体外培养的原代海马神经元细胞活力,作用呈浓度、时间依赖性(P<0.05);与Aβ损伤组相比,hUCMSCsCM可对抗Aβ引起的细胞活力下降(P<0.05).与溶剂对照组相比,Aβ(终浓度10 μmol/L)处理12 h显著增加体外培养的原代海马神经元细胞凋亡;与Aβ损伤组相比,hUCMSCsCM可减少 Aβ诱导的神经元凋亡,抑制 Aβ 引起的 cyt-c 释放,作用呈浓度依赖性(P <0.05).结论 人脐带间充质干细胞条件培养液可抑制Aβ引起的原代培养海马神经元凋亡,发挥神经保护作用,其机制可能与抑制cyt-c释放有关.