负压封闭引流技术干预兔骨骼肌缺血再灌注损伤后炎性反应的实验研究

目的 探讨负压封闭引流(VSD)技术减轻兔骨骼肌缺血再灌注损伤(I/R)的相关作用机制.方法 将30只新西兰大耳兔分成对照(假手术)组、I/R组和I/R+ VSD组,每组10只.通过阻断左后肢股动脉、静脉(4 h)和再灌注(6 h)的方法建立兔I/R模型.在此基础上使用VSD技术进行再灌注时的干预,然后对各组骨骼肌组织进行肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)、补体5a(C5a)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和多形核中性白细胞(PMN)的检测,对各组外周静脉血进行白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、TNF-α和IL-6的测定.结果 3组骨骼肌和外周血中所测定的炎症因子、炎症标志物及炎症细胞水平存在差异,与对照组比较,I/R组TNF-α、IL-6、PGE2和C5a水平均显著增高(t=5.157,P＜0.01),I/R+VSD组TNF-α和C5a水平显著增高(t=2.373,P=0.035);与I/R组比较,I/R+VSD组TNF-α、IL-6、PGE2和C5a均显著降低(t=4.699,P＜0.01);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结果显示,对照组、I/R组和I/R+ VSD组hs-CRP蛋白相对灰度比分别为0.738±0.467,2.341±0.773和1.299±0.391,差异具有统计学意义(F=45.453,P＜0.01);免疫组织化学法检测及图像分析结果显示,对照组、I/R组和I/R+VSD组PMN特异性标记物CD11b表达分别为113±58,362±101和252±87,差异具有统计学意义(F=26.448,P＜0.01);与对照组比较,I/R组TNF-α、IL-6、CRP水平和WBC数量显著增高(t=9.247,P＜0.01),I/R+VSD组TNF-α、IL-6和CRP水平显著增高(t=4.754,P＜0.01);与I/R组比较,I/R+VSD组的TNF-α、IL-6、CRP水平和WBC数量显著降低(t=7.415,P＜0.01).结论 VSD技术可通过减轻骨骼肌缺血再灌注后的局部炎性反应,减轻全身炎性反应,改善预后.