TATp和CXCR4修饰的载V P3基因超声微泡制备及体外寻靶实验

目的：制备一种载VP3基因、反式激活转录激活肽（TATp）与基质细胞衍生因子‐1（SDF‐1）同时修饰的新型载基因高分子靶向超声造影剂，表征其性质。方法采用W／O／W双乳化法制备载基因超声微泡。并通过硫醚键将SDF‐1与TATp共价连接到聚乳酸／羟基乙酸共聚物（PLGA）微泡的表面，制备成靶向载基因超声微泡。Malvern测量仪测定其粒径、分布及表面电位，流式细胞仪及共聚焦显微镜检测TATp、SDF‐1在高分子微泡表面的连接状况，酶切反应实验鉴定其对DNA的保护性，光镜观察及流式细胞仪初步评估其体外寻靶能力，超声考察体外成像。结果靶向载基因超声微泡呈规则球形。粒径为（536．00±16．55）nm ，分布集中，表面电位为（－0．08±0．08）mV。平均载药量为0．62％，平均包封率为36．13％。对DNA保护作用持续60 min ，未见损坏。TATp、SDF‐1同时加载于PLGA微泡表面的连接率为69．84％。体外寻靶实验显示，靶向微泡较多地稳定簇聚在舌癌SCC‐15细胞膜上，连接率为91．44％。而非靶向微泡较少结合，连接率为12．96％。体外超声显像呈细小点状、均匀高回声。结论成功制备出TATp‐SDF‐1‐VP3‐PEG‐PLGA微泡，其能在体外高效靶向结合舌鳞癌SCC‐15细胞，且短时间穿过细胞膜。体外成像效果较好。