新生小鼠海马神经元培养及形态学观察的优化方法

目的：探讨一种更加优化的体外培养海马神经元及进行形态学观察的方法，为阿尔茨海默病（A D ）神经突触的研究奠定基础。方法选择新出生后0～1 d的C57BL/6J小鼠，断头取双侧海马，采用低浓度胰酶消化加机械分离的方法，使用无血清培养基进行神经元原代培养，培养17 d后利用磷酸钙共沉淀法进行绿色荧光蛋白（GFP ）的转染，于荧光显微镜下观察海马神经元和树突棘形态特征。结果采用此方法进行的海马神经元原代细胞培养，神经元生长良好，转染GFP后可以看到清晰的轴突/树突和树突棘突等典型的神经细胞结构特征。结论此技术方法所培养的海马神经元生长良好，磷酸钙共沉淀法转染GFP后能够更加清晰地观察到神经元及树突棘的形态特征。