锌指蛋白ZNF139抑制骨肉瘤细胞增殖和转移的机制研究

目的 探讨锌指蛋白ZNF139在骨肉瘤细胞和组织中表达,及对骨肉瘤细胞143B增殖和转移的影响,并初步探讨其作用机制.方法 通过qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验分析ZNF139在骨肉瘤细胞系和组织中的相对表达;转染pcDNA3.1(+)-ZNF139质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Vector质粒(对照组)至143B细胞系中,免疫蛋白印迹实验验证ZNF139的过表达;通过CCK 8实验和细胞克隆实验分析ZNF139对细胞增殖的影响;transwell细胞迁移和侵袭实验分析ZNF139对细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞周期和凋亡实验验证ZNF139过表达对细胞增殖的作用机制;免疫蛋白印迹实验验证ZNF139基因对p53信号通路的影响.结果 与正常成骨细胞和组织相比,ZNF139在骨肉瘤细胞和组织中的表达明显下调(P＜0.001),差异具有统计学意义;与对照组相比(100％),转染后24、48、72 h细胞活性受到明显的抑制(P＜0.05),实验组细胞克隆形成明显受到抑制(43.44％±5.55％)(P＜0.05);过表达ZNF139后细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P＜0.001);流式细胞实验发现,实验组细胞明显阻滞于G1期(P＜0.001),同时实验组中细胞凋亡率明显升高(P＜0.001);过表达ZNF139后通过促进p53的表达及下游信号转导.结论 ZNF139在人骨肉瘤瘤组织中表达下调,通过促进p53信号通路参与骨肉瘤的进展.