异烟肼致肝细胞损伤过程中组蛋白乙酰化对内质网应激的调控作用

目的 探讨异烟肼(INH)致肝细胞损伤过程中组蛋白乙酰化对内质网应激(ERS)的调控作用,旨在为INH致肝细胞损伤的预防提供依据.方法 将人正常肝细胞株HL-7702(以下称HL-7702细胞)传代培养,取传5代对数生长期细胞随机分为观察组、对照组,观察组给予INH干预,对照组不予INH干预.采用ELISA法检测两组培养液上清ALT、AST活性.另取传5代对数生长期细胞接种于6孔板,RPMI1640培养液培养24 h,随机将细胞分为空白对照组、INH组、C646组、INH+ C646组、MS-275组和INH+ MS-275组,空白对照组更换为2 mL新的RPMI1640培养液;INH组更换为2 mL含INH1000 μg/mL的RPMI1640培养液;C646组更换为2 mL含C6465 μmol/L的RPMI1640培养液;INH+ C646组更换为2 mL含C6465 μmol/L和INH1000 μg/mL的RPMI1640培养液;MS-275组更换为2 mL含MS-2755 μmol/L的RPMI1640培养液;INH+ MS-275组更换为2 mL含MS-2755 μmol/L和INH1000 μg/mL的RPMI1640培养液.各组继续培养3 h,收集细胞,采用Real-time PCR法检测P300、HDAC1、GRP78、CHOP mRNA表达;收集培养液上清,采用ELISA法检测P300、HDAC1、GRP78、CHOP蛋白含量.结果 观察组培养液上清ALT、AST活性均明显高于对照组(P均<0.05).与空白对照组比较,INH组HDAC1、GRP78、CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显增加,P300 mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05).与INH组比较,INH+ C646组P300、GRP78 mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05),CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显升高(P均<0.05),而HDAC1 mRNA表达和蛋白含量变化不明显(P均>0.05);与INH组比较,INH+ MS-275组HDAC1、CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05),GRP78 mRNA表达和蛋白含量均明显升高(P均<0.05),P300 mRNA表达和蛋白含量变化不明显(P均>0.05).结论 INH致肝细胞损伤过程中组蛋白通过乙酰化参与调控ERS.