黄连温胆汤含药血清改善小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制探讨

目的 探讨黄连温胆汤含药血清对小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的改善作用及其分子机制.方法取SD大鼠各15只,分别灌服黄连温胆汤、等体积蒸馏水5 d后,腹主动脉采血,制备黄连温胆汤含药血清及空白血清.经典鸡尾酒方法使小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1分化为脂肪细胞,再应用地塞米松刺激使其发生IR制备IR模型,随机分为模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组.另取未进行IR造模的脂肪细胞作为正常组.各组细胞均培养于DMEM高糖+5％FBS培养基,模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组分别加入8％空白血清、4％含药血清+4％空白血清、盐酸二甲双胍溶液1 mmol/L,正常组加入8％空白血清,均培养36 h.采用Real time qPCR法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)信号通路相关基因胰岛素受体底物1(IRS1)、PI3K-p85α亚基、GLUT4 mRNA表达.采用Western blotting法检测IRS1、p-IRS1(Tyr612)、PI3K-p85α、p-PI3K-p85α(Tyr607)、GLUT4蛋白表达.结果模型组葡萄糖消耗量低于正常组,黄连温胆汤组葡萄糖消耗量高于模型组(P均<0.05).与正常组比较,模型组GLUT4 mRNA表达下调,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.05);与模型组比较,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.01).与正常组比较,模型组p-IRS1(Tyr612)/IRS1、p-PI3K-p85α(Tyr607)/PI3K-p85α、GLUT4蛋白表达下调(P均<0.05),黄连温胆汤组和二甲双胍组蛋白表达均较模型组上调(P均<0.05).结论黄连温胆汤含药血清可以改善鼠脂肪细胞的IR,其机制为可能通过PI3K-GLUT4信号传导途径发挥作用.