Smad泛素化调节因子和Arkadia在大鼠肺纤维化中的作用研究

目的 探讨Smad泛素化调节因子(Smurf)和Arkadia在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成中的作用及可能的分子机制.方法 将24只无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型7d组、模型14 d组、模型28 d组,每组6只.模型组大鼠气管内滴入博莱霉素(10 mg/kg)建立肺纤维化动物模型,对照组气管内滴入等体积0.9％氯化钠注射液.于造模后第7、14和28天分批处死大鼠.应用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察肺组织炎症及纤维化情况;应用逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测Ⅰ型胶原α1(COL1A1)、Arkadia、Smurf1、Smurf2、Smad7、Ski和转化生长因子βⅠ型受体(TβR Ⅰ)的表达.结果 HE染色和Masson染色显示肺纤维化模型建立成功.模型7、14、28 d组大鼠肺组织COL1A1蛋白表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).模型7、14、28 d组大鼠肺组织Arkadia mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组,Smurf2 mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(均P＜0.05).模型7d组大鼠肺组织Smad7和Ski蛋白表达水平明显高于对照组,随后Smad7和Ski蛋白表达水平随时间延长而逐渐降低,至第28天均低于对照组水平(均P ＜0.05),但各组间Smad7和Ski mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).模型7、14、28 d组大鼠肺组织TβR Ⅰ mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组[(0.340±0.056)、(0.520±0.021)、(1.014 ±0.190)比(0.244±0.033);(0.453±0.033)、(0.617 ±0.060)、(0.720±0.038)比(0.309±0.031)],差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 Smurf2和Arkadia均参与了博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成;Arkadia可能通过泛素化降解蛋白途径实现对Smad7和Ski蛋白表达的下调,促进肺纤维化形成.