UCP2+/+和UCP2-/-小鼠的鉴定及表型初步分析

目的 对解耦联蛋白2 (UCP2)转基因(UCP2+/+)和UCP2敲除(UCP2-/-)小鼠进行鉴定及表型初步分析.方法 采用PCR法鉴定UCP2+/+和野生型(C57BL/6J)小鼠UCP2基因的表达.采用Western blot法检测UCP2+/+、UCP2-/-和C57BL/6J小鼠肝脏UCP2蛋白的表达.绘制0～12周龄UCP2+/+、UCP2-/-和C57BL/6J小鼠生长曲线,并肉眼观察UCP2+/+和UCP2-/-小鼠在外观和行为上有无异常.分别采用高脂饮食和普通饮食饲喂UCP2+/+、UCP2-/-和C57BL/6J小鼠12周,检测其空腹血糖和胰岛素水平.结果 UCP2+/+小鼠UCP2基因片段为280 bp,且肝脏表达相对分子量约为32 kD的UCP2蛋白.与C57BL/6J小鼠相比,UCP2+/+小鼠肝脏UCP2表达量升高(P＜0.05),而UCP2-小鼠肝脏未见UCP2蛋白表达.UCP2+/+和UCP2-/-小鼠与C57BL/6J小鼠相比,在外观和行为上未见异常.与C57BL/6J小鼠相比,饲喂普通饲料对UCP2+/+和UCP2-/-小鼠空腹血糖和胰岛素水平影响差异无统计学意义(P＞0.05).与饲喂普通饲料相比,高脂饲料能升高C57BL/6J和UCP2+/+小鼠空腹血糖水平(P＜0.05),提高UCP2-/-小鼠胰岛素的分泌(P＜0.05).结论 成功鉴定了小鼠UCP2+/+和UCP2-/-基因型;高脂饮食下,UCP2与小鼠血糖水平和胰岛素分泌相关.