洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌的抑菌作用研究

目的:探讨洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌的抑菌作用.方法:选用56株结核分枝杆菌临床分离株作为研究对象,结核分枝杆菌标准菌株(H37RV)为对照用菌株,通过分格平板琼脂比例法抑菌试验,观察不同浓度洋葱中黄酮类化合物、黄酮与一线抗结核药物联合使用对结核分枝杆菌的抑菌作用;小鼠腹腔巨噬细胞与结核分枝杆菌共同孵育后,将细胞分为对照组、560μg/mL黄酮组、280μg/mL黄酮组、140μg/mL黄酮组、28μg/mL黄酮组、异烟肼(INH)组,给予相应药物干预,通过实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA水平,通过酶联免疫吸附法检测细胞培养液中细胞因子水平.结果:(1)与2.0μg/mL INH、1.0μg/mL利福平(REP)、5.0μg/mL乙胺丁醇(EMB)、2.0μg/mL链霉素(SM)比较,28μg/mL黄酮敏感率较低,560、280μg/mL黄酮敏感率较高,差异有统计学意义(P<0.05),560、280μg/mL黄酮敏感率比较差异无统计学意义(P>0.05).(2)与2.0μg/mL INH、1.0μg/mL REP、5.0μg/mL EMB、2.0μg/mL SM比较,各药物联合使用280μg/mL黄酮后敏感率均较高,差异有统计学意义(P<0.05).(3)与INH组比较,280μg/mL黄酮组、560μg/mL黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较低及拷贝数较高,28μg/mL黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较高及拷贝数较低,差异有统计学意义(P<0.05).(4)与INH组比较,280μg/mL黄酮组、560μg/mL黄酮组细胞培养液中水平γ-干扰素、白细胞介素-1β水平较高,28μg/mL黄酮组细胞培养液中水平γ-干扰素、白细胞介素-1β、白细胞介素-6水平较低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌有明显的体外抑菌作用,能够协同INH、REP、EMB及SM抑菌,还能促进巨噬细胞释放γ-干扰素、白细胞介素-1β等细胞因子,提高巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的能力,在≤280μg/mL范围内,黄酮类化合物浓度越高作用越强.