无精症患者非基因整合诱导多能干细胞系的建立

目的 利用非基因整合方法 建立无精症患者的诱导多能干细胞系(iPSCs).方法 采用目前商品化的无血清完全培养基(TeSR?2)和胚胎干细胞培养基(Stem Adhere?Defined Matrix)限定培养体系,利用非基因整合的仙台病毒感染无精症患者外周血单个核细胞,建立了无精症患者的iPSCs系,应用免疫荧光、核型分析、拟胚体和畸胎瘤实验对iPSCs系的多能性、核型及分化能力进行鉴定.结果 建立的iPSCs系具有人胚胎干细胞的特征.免疫荧光显示,干细胞多能性标志基因表达的八聚体结合转录因子4(OCT4)、性别决定基因相关蛋白2(SOX2)以及干细胞特异表面抗原阶段特异性胚胎抗原-4(SSEA-4)、肿瘤排斥抗原-1-60(TRA-1-60)均阳性;核型分析显示其具有正常的核型;拟胚体和畸胎瘤实验显示其在体外和体内具有向3个胚层分化的能力.结论 利用非基因整合方法 成功构建了无精症患者的诱导多能干细胞系.