针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体的制备

目的：制备特异性的鼠源单克隆抗DNAH2（Homo sapiens dynein，axonemal，heavy chain 2）抗体。方法首先针对人DNAH2蛋白N端1~300 aa序列，构建可表达His标签的免疫原融合表达质粒，在大肠杆菌内以IPTG诱导His-免疫原的表达并纯化；然后免疫BALB/c小鼠，分离出脾淋巴细胞，并与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞；最后以酶联免疫吸附测定（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）筛选阳性杂交瘤细胞。结果利用IPTG有效诱导了大肠杆菌内DNAH2免疫原的表达；筛选的阳性杂交瘤细胞检测出DNAH2蛋白条带。结论成功制备针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体。