微小RNA-205通过靶向调控ZEB1抑制前列腺癌细胞迁移能力的研究

目的 观察微小RNA-205(miR-205)对前列腺癌细胞PC3迁移能力以及靶基因E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响.方法 采用实时定量PCR检测各前列腺癌细胞株(PC3、LNCaP、DU145)和良性前列腺上皮细胞(PrEC)中 miR-205的mRNA相对表达量,通过miR-205模拟物(miR-205 mimics)、miR-205抑制物(miR-205 inhibitor)和相应的空载体分别转染前列腺癌细胞株PC3后,将PC3细胞分为过表达miR-205组、mimics对照组、抑制miR-205组和inhibitor对照组4组,利用细胞划痕试验和Transwell细胞侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭能力.采用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞ZEB1的蛋白表达水平,并通过荧光素酶报告试验验证miR-205与ZEB1基因的直接调控关系.利用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞的上皮钙黏素和波形蛋白表达水平.结果 前列腺癌细胞DU145、LNCaP和PC3的miR-205 mRNA相对表达量均低于良性前列腺上皮细胞PrEC(P均<0.01);PC3的miR-205 mRNA相对表达量最低,选为进一步试验的细胞株.24 h后,划痕试验显示过表达miR-205组的迁移细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组的迁移细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01);Transwell细胞侵袭试验显示,过表达miR-205组侵袭细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组侵袭细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01).过表达miR-205组PC3细胞的ZEB1蛋白表达水平低于mimics对照组(P<0.01).过表达miR-205组中,携带野生型3'-非翻译区序列载体PC3细胞的荧光素酶活性值低于携带突变型3'-非翻译区序列载体PC3细胞(P<0.01).与mimics对照组相比,过表达miR-205组的上皮钙黏素蛋白表达水平降低、波形蛋白表达水平升高(P均<0.05).结论 miR-205可能通过靶向降低ZEB1基因的蛋白表达,抑制前列腺癌细胞的迁移能力.