基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定丝状真菌的影响因素分析

目的 评估菌株培养条件、培养天数以及结果判定截断值(cut-off value,COv)3种因素对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定丝状真菌能力的影响.方法 将78株受试丝状真菌分别接种到沙堡弱葡萄糖琼脂(sabouraud dextrose agar,SDA)、土豆葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)两种培养基及28、35℃两种培养温度共4种组合的培养条件下进行培养,并于培养第2、3、4、5天以及第7天对其进行MALDI-TOF MS分析,根据鉴定率的差异筛选菌株MALDI-TOF MS鉴定用最佳培养条件和培养天数;下调MALDI-TOF MS结果判定COV,分析其对MALDI-TOF MS丝状真菌鉴定率的影响.结果 受试菌株在SDA和PDA两种培养基间的MALDI-TOF MS鉴定率无显著性差异(x2=0.467,P=0.792),但28℃培养温度下的鉴定率高于35℃培养温度(x2=7.195,P=0.027);培养第2、3天种水平(40.3％和34.3％)和属水平(44.8％和46.3％)鉴定率均较高;将MALDI-TOF MS种水平判定COV由＞2.0下调至＞1.7后,受试菌株种水平判定率显著提升(85.9％比32.1％,x2 =40.119,P＜0.01)且不增加错误鉴定率.结论 丝状真菌以SDA或PDA培养基28℃培养2～3d,并以分值＞1.7作为种水平判定COV,可有效提高MALDI-TOF MS对丝状真菌的鉴定能力.