土壤浸提液中硝酸盐氮氧同位素组成的反硝化细菌法测定

本研究优化了采用反硝化细菌法同时测定土壤浸提液中硝酸盐氮氧同位素组成的方法。在已有研究结果的基础上，通过采用5000~8000 r·min-1的转速离心、高纯氮气吹扫1 h、减少加样量及改造仪器自动进样器等措施对已发表方法进行了优化。对国际标准样品 USGS34的分析表明，0.1~0.8μg NO-3-N 样品量即可以得到较稳定、准确的测定值和校正值；同一时间内制备的硝酸盐δ15N 的 SD 介于0.05‰~0.09‰之间，δ18O 的 SD 介于0.28‰~0.48‰之间；在三个月之内δ15N 和δ18O 的测定值基本一致，表明该方法具有较好的准确度、精密度和稳定性。通过研究浸提剂、保存条件以及加热对测定土壤浸提液中硝酸盐氮氧同位素组成的影响，结果表明：常用的去离子水、KCl、CaCl2可能都含有微量的硝酸盐，随着加样量增大，浸提剂中含有的硝酸盐可能就会影响δ15N 和δ18O的测定；对于土壤硝酸盐的浸提液，冷冻保存效果较好，保证了土壤硝酸盐氮氧同位素的准确性和稳定性；尽管加热对硝酸盐标准样品 USGS34和 IAEA-NO3的δ15N 没有显著影响，但δ18O 显著升高，说明加热易引起氧同位素分馏；而土壤硝酸盐浸提液样品加热前后的δ15N 和δ18O 的测定值没有显著变化，因此为避免产生氧同位素分馏和节省测试时间，建议同时测定土壤浸提液硝酸盐δ15N和δ18O 时直接和反硝化细菌反应。应用本方法对不同肥料处理田间土壤浸提液硝酸盐的氮氧同位素组成进行了测定。