泻火化瘀通窍法对感音性耳聋大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响

目的 探讨泻火化瘀通窍法对高迁移率族蛋白B1(highy mobility group proteinbox1,HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end product receptor,RAGE)介导的耳蜗缺血再灌注损伤(cochlea ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的作用效果及机制.方法 36只健康SPF级SD大鼠,雌雄各半,平均体质量(220±20)g.采用随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、泻火化瘀通窍低剂量组(12.5g/kg)、泻火化瘀通窍中剂量组(25.0g/kg)、泻火化瘀通窍高剂量组(37.5g/kg)和地塞米松组(20mg/kg),每组各6只.以血管阻断法建立CIRI大鼠模型,并给予相应药物干预.测定大鼠脑干听觉诱发电位(brainstem auditory evoked potential,BAEP)阈值,苏木精–伊红染色观察大鼠耳蜗组织病变并定量评分,酶联免疫吸附法测定耳蜗组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量及活性,蛋白质印迹法检测大鼠耳蜗组织HMGB1、RAGE、肿瘤坏死因子–α(tumor necrosis factor–α,TNF–α)、白细胞介素–1β(interleukin–1β,IL–1β)、磷酸化核因子–κB p65(phosphorylation nuclear factor–κB p65,p–NF–κB p65)、胱天蛋白酶–3(caspase–3)及活化caspase–3(cleaved–caspase–3)的蛋白表达情况.结果 与假手术组相比,模型组大鼠耳蜗毛细胞变形、缺损严重,苏木精–伊红半定量评分均显著增加(P<0.01),SOD、CAT活性含量均显著降低(P<0.01),而BAEP阈值、MDA含量均显著升高(P<0.01),HMGB1、RAGE、TNF–α、IL–1β、p–NF–κB p65、cleaved–caspase–3/caspase–3蛋白表达均显著增加(P<0.01);与模型组相比,泻火化瘀通窍各剂量组和地塞米松组大鼠的CAT活性含量均显著上升(P<0.01),泻火化瘀通窍中、高剂量组和地塞米松组大鼠的苏木精–伊红半定量评分、BAEP阈值、MDA含量、HMGB1和cleaved–caspase–3/caspase–3蛋白表达均显著降低(P<0.05),泻火化瘀通窍高剂量组和地塞米松组大鼠的RAGE、p–NF–κB p65、TNF–α、IL–1β蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论 泻火化瘀通窍法对CIRI大鼠具有改善作用,其作用与抑制HMGB1/RAGE信号通路有关.