莴苣花叶病毒纳米酶免疫层析试纸条的研制

以莴苣花叶病毒为研究对象,将带有LMV纳米酶标记的兔抗体IgG与硝酸纤维素膜质控线上的兔抗体结合,并在二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)的作用下进行显色,建立纳米酶免疫层析试纸条方法(Nanozyme Immunochromatographic Strip Assay,NISA).用研制的NISA和酶联免疫吸附测定法(ELISA)对提纯LMV进行灵敏度比较实验,结果显示NISA和ELISA可分别检测低至102 ng/mL和103ng/mL的提纯LMV,前者比后者灵敏度高10倍,表明该试纸条具有较高的灵敏度,同时又具有比ELISA操作简单,价格低廉上的优势.用同属同寄主病毒作对照进行特异性实验,结果显示只有LMV为阳性,7种对照病毒均为阴性,表明建立的NISA具有良好的特异性.用研制的试纸条对待测样品进行检测,并用ELISA方法及基因测序方法对检测结果进行验证,数据显示三者结果一致.该试纸条的研制为LMV的检测提供了一种快速、高效的新技术.