SRBSDVP8蛋白的多克隆抗体制备及其应用
Hybrid Rice（2020）
摘要
克隆了南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的核心蛋白P8基因,并利用Gateway原核表达系统,将P8基因构建到原核表达载体pDEST17上,经转化大肠杆菌表达菌株Rosetta细胞,通过IPTG诱导P8蛋白表达.以原核表达的P8蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备多克隆抗体.制备的多克隆抗体经Western blotting检测,结果显示抗体能够特异性地结合P8蛋白.Dot-ELISA分析表明,制备的P8抗体能够检测感染SRBSDV的水稻植株.间接ELISA分析表明,抗体滴度为1:3 200.说明本实验所制备的抗体可用于田间南方水稻黑条矮缩病的检测,同时也为研究SRBSDV P8蛋白的功能及其与昆虫和寄主之间的互作奠定了基础.
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