新城疫病毒V蛋白亚细胞定位

应用核质分离、Western blot和激光共聚焦等试验方法检测新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)V蛋白在DF-1细胞的亚细胞分布;通过对预测的V蛋白核定位信号(nuclear location signal,NLS)序列进行缺失表达,鉴定V蛋白核定位的关键结构城;通过荧光素酶报告基因试验检测核定位序列对V蛋白拮抗干扰素功能的影响.结果 显示,V蛋白主要分布在细胞质,少量分布于细胞核中;NLS-2(138 GSPRRASPTSGPTTREPTELWKQPGKTAAP167)或NLS-3(1711RPWKPGH RRE HSISWTMEGVTTISWCNPSC200)是V蛋白入核关键结构域,其中V-NLS-2中R141、R142、R152、K159可能为影响其入核的关键氨基酸;NLS-2是影响V蛋白发挥拮抗IFN-β功能的重要结构域.