猪BST-2全基因克隆、真核表达载体构建及组织表达谱分析

为研究猪BST-2基因的生物学功能,用特异性的引物扩增猪BST-2基因,并利用生物信息学软件对猪BST-2基因及氨基酸进行分子特性分析,同时进行了猪BST-2蛋白的真核表这及组织表达谱分析.结果表明;猪BST-2基因全长851 bp,其中5'-UTR为23 bp,3'-UTR为294 bp,CDS区为534 bp,编码1 77个氨基酸,猪源BST-2蛋白氨基酸序列与大猩猩、仓鼠、家鼠、驴、猫、牛、猕猴、绵羊、人BST-2蛋白氨基酸序列同源性分剐为46.1％,41.7％,39.5％,35.4％,42.0％,40.5％,44.4％,38.7％,46.8％.含有2个跨膜结构(27～49 aa和154～176 aa),2个潜在的糖基化位点,14个潜在的磷酸化位点,包含磷酸激酶ATM、CKⅡ、PKA、PKC的结合位点.构建真核质粒并转染发现猪BST-2蛋白能够在Vero细胞内正确表达.半定量PCR检测发现BST-2基因在所有组织中均有表达,尤其是在免疫组织及器官(淋巴结、胸腺、扁桃体、脾)、大肠、小肠中的表这量较高.本试验为今后进一步分析验证猪BST-2蛋白的抗病毒机制奠定了基础.