大肠杆菌Nissle 1917隐秘质粒消除方法的建立

Chinese Journal of Veterinary Science（2016）

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摘要

质粒消除旨在获得无质粒菌株,是对益生菌进行遗传改造所需的一项重要技术.本试验建立在质粒不相容性的基础上,引入自杀性载体pRE112作为辅助工具,使用分子生物学方法构建重组自杀质粒pMUT1-pRE112和pMUT2-pRE112,将其分别导入携带2个大隐秘质粒pMUT1和pMUT2的益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Escherich-ia coli Nissle 1917,EcN),利用重组自杀质粒去除EcN内原有隐秘质粒并在含有10％蔗糖的LB培养基上实施自杀质粒自身消除.结果试验成功获得EcN无质粒克隆菌株(Escherichia coli Nissle 1917 cured of its two cryptic plasmids pMUT1 and pMUT2,EcNc).为优质益生菌EcN更好的潜在应用研究奠定基础.

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