马立克病毒UL36USP蛋白的表达及其抗体制备

Chinese Journal of Veterinary Science(2014)

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摘要
UL36USP是马立克病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),本试验以提取MDCC-MSB1细胞的基因组为模板通过PCR获得目的基因,将UL 36USP基因克隆入pMD18T载体,测序正确并酶切鉴定后,将目的基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UL36USP.将重组质粒转化BL21 (DE3)E.coli中,IPTG诱导表达并使用Ni-NTA Agarose亲和层析进行纯化得到目的蛋白.应用纯化后的UL36USP免疫獭兔制备多克隆抗体.使用昆虫细胞表达系统表达的UL36片段检测多克隆抗体的特异性.结果显示成功制备特异性的UL36USP抗体.
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