发酵饲料中乳酸菌含量检测的EMA-qPCR方法
Acta Veterinaria Et Zootechnica Sinica（2019）
摘要
旨在快速检测发酵饲料中乳酸菌含量,将叠氮溴乙锭(EMA)与q-PCR技术相结合,通过对诸如EMA浓度、曝光时间等影响EMA的因素进行探索,确定EMA的作用条件.在试验条件下用EMA处理已知浓度的乳酸菌菌液,提取乳酸菌DNA,结合q-PCR建立Ct值与乳酸菌含量对数值之间的标准曲线.利用标准曲线,快速计算发酵饲料中的乳酸菌含量.结果 表明EMA浓度在3～4 μg·mL-1曝光10 min可有效抑制死菌DNA的扩增,从而消除死菌DNA扩增对Ct值的影响.通过对8份发酵饲料进行检测,其结果与平板计数具有较高的符合度.EMA-qPCR方法可用于快速准确地检测发酵饲料中活的乳酸菌含量.
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