可控表达pGH基因转基因小鼠模型的建立与分析

旨在构建整合型可控表达猪生长激素(porcine growth hormone,pGH)基因转基因小鼠模型,通过控制GH的表达时间和表达量来减少 GH过早表达产生的副作用,对于培育高饲料转化率大家畜具有重要研究意义.利用本课题组前期成功构建并在PK15细胞系中验证的整合型诱导表达 pGH四环素(Tet-on)载体,通过原核显微注射方法制备转基因小鼠.以Southern blot鉴定为阳性的 Founder鼠为基础扩繁培育,对转基因后代鼠3～10周龄通过饮水中添加诱导底物强力霉素(DOX)进行诱导试验;利用RT-qPCR技术检测外源基因表达水平;利用放射性免疫检测方法对小鼠血液中猪生长激素水平进行定量检测,同时称重,评估转入基因对小鼠机体表型的影响.结果表明,转基因小鼠诱导组的体重与转基因小鼠非诱导组和同窝非转基因组小鼠相比显著增大(P＜0.05),血清中pGH水平显著上升(P＜0.05),说明外源GH有效表达并且调节动物机体的生长.结果提示,该模型的建立有助于深入研究 GH对机体发育的影响以及机体中影响GH 分泌的分子机制和信号通路,促进GH在家畜生产中的应用,也为制备安全、高效的GH转基因大家畜奠定理论基础.