PCV4 SYBR Green I实时荧光定量PCR方法的建立及应用

Xiaowu Huang,Qian Du,Jingshan Bi,Zhengji Wei,Lianbin Zou,Zixin Zhao,Xiukui Yan,Zhixiao Han,Jialiang Xin,Min Zheng

CHINA ANIMAL HEALTH INSPECTION（2020）

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摘要

为建立一种灵敏、可快速检测猪圆环病毒4型(PCV4)的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,根据PCV4 Rep基因的保守区域设计引物,建立针对PCV4的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行评价.结果显示,该检测方法的Ct值与标准品在5.64×102～5.64×109 copies/μL范围内呈良好的线性关系,R2为0.999,斜率为-3.638,检测下限为5.64×102 copies/μL,且无非特异性扩增.利用该方法对56份临床样品进行检测,发现PCV4核酸阳性率为3.57％,比普通PCR更灵敏可靠.结果表明,本试验建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法可用于PCV4的快速诊断.

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