弓形虫GT1虫株GRA15蛋白的表达及其反应原性分析

CHINA ANIMAL HEALTH INSPECTION(2019)

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摘要
为了分析弓形虫GT1虫株GRA15(GRA15GT1)蛋白的反应原性,通过PCR扩增编码GRA15GT152~635氨基酸肽段的基因片段,构建pGEX-6P-1-GRA15GT1载体,转化BL21菌诱导表达;通过SDS-PAGE和Western blot方法进行表达验证及反应原性分析.结果显示:SDS-PAGE及以GST标签抗体为一抗进行Western blot,均有目的条带,比理论值稍大;以猪弓形虫阳性血清为一抗的Western blot条带与GST抗体孵育后的条带大小一致.上述结果表明,GRA15GT1蛋白具有较好的反应原性,这为下一步分段表达GRA15GT1蛋白,研究其在弓形虫血清学分型中的应用奠定了基础.
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