鸭源新型鹅细小病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用

2015年暴发了一种由新型鹅细小病毒(NGPV)引起的鸭喙萎缩-侏儒症(BADS)的疾病,造成了严重的经济损失.本研究根据GenBank中NGPV相对保守的VP3基因序列,设计1对特异性引物和1条TaqMan探针,并对其反应条件进行优化,建立了一种检测NGPV的TaqMan荧光定量PCR方法.敏感性试验结果表明,该方法检测敏感性达到37.2拷贝/μL,比常规PCR灵敏度高100倍,而且该方法对鸭其他主要病原核酸检测均为阴性,具有良好的特异性.批内和批间的检测变异系数均小于等于2.2％.对收集的50份病料进行检测,本研究建立的荧光定量PCR方法NGPV检出率为78％,普通PCR方法为50％,荧光定量PCR方法的敏感性明显高于普通常规PCR方法.研究结果表明该方法具有操作简便、敏感性高和特异性强的特点,可用于NGPV的快速诊断.