非洲猪瘟病毒外膜蛋白CD2v的原核表达及其免疫特性的研究

本研究参考非洲猪瘟病毒(ASFV)国内分离株SY18株的EP402R基因(编码CD2v蛋白),优化其序列,设计特异性引物扩增.将去除跨膜保留胞外区或胞内区的两种截短体克隆到原核表达载体pET-28a中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.经IPTG诱导,铁蛋白融合CD2v胞外区(CD2vN-Fe)和铁蛋白融合CD2v胞外-胞内区(CD2v-NC-Fe)均获得高效表达.以该融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性.结果 表明:CD2vN-Fe多抗特异性较强.本研究为建立ASFV的血清学鉴别检测方法奠定了基础.