鸭疫里氏杆菌外膜脂蛋白的表达及其免疫原性的分析

Patiguli Wumaer,Guo DongChun,Zhang AiQin,Liu JiaSen,Yuan DongWei, Jiang Qian,Lin Huan,Si ChangDe,Qu LianDong

Chinese Veterinary Science（2013）

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摘要

为掌握鸭疫里氏杆菌Riean1110基因表达产物的免疫原性,根据GenBank上公布的鸭疫里氏杆菌DSM15868株(登录号为NC014738)的基因序列设计1对特异性引物,扩增了血清1型鸭疫里氏杆菌HLG1株的Riean1110基因.将其克隆到表达载体pPRO-EX-Htb中,构建重组表达质粒pHtb-RA1110,转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS,用IPTG诱导重组蛋白的表达.SDS-PAGE分析表明,诱导表达的目的蛋白的分子质量大约为56 ku,与预期大小相符,以包涵体形式存在.Western-blot分析表明,诱导的重组蛋白能特异性地识别鸭疫里氏杆菌阳性血清,具有良好的抗原性.用纯化的Riean1110蛋白免疫SPF鸭,经ELISA检测,可产生高水平的抗体.结果表明,制备的重组Riean1110蛋白为建立鸭疫里氏杆菌的血清学检测方法奠定了基础.

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