禽流感病毒多重荧光RT-PCR检测技术的建立与初步应用

国内外检测禽流感病毒最常用和经典的方法是鸡胚病毒分离,该方法是OIE 推荐的方法,但是耗费时间长.为缩短检测时间,目前我们已成功建立了灵敏、特异的荧光RT-PCR检测方法,并已经应用于活禽、禽组织及环境中禽流感病毒的快速检测与H5、H7、H9亚型的分型鉴定.鉴于我国2004年年初暴发H5N1亚型禽流感疫情,以及高致病力禽流感通常由H5和H7亚型引起,因此在平时疫情检测和实施扑灭措施时对这些病毒亚型进行快速检测和定型非常重要,在本研究中,为能进一步提高检测效率,节约成本,我们进一步研制开发的H5/H7和H5/N1多重荧光PCR技术,实现了在一次反应中对样本中的病毒进行快速定型,并对这两种多重检测方法进行了敏感性和特异性评价,进而用于临床样品的检测,并与经典的鸡胚病毒分离、血凝抑制试验及神经氨酸酶抑制试验进行了比较.