食源性单核细胞增生型李斯特菌arcD基因克隆及序列分析

为了对食源性单核细胞增生型李斯特菌LM5567的arcD基因进行克隆和序列分析,实验利用PCR方法对arcD基因进行扩增,连接至pMD19-T载体,将连接产物转化至DH5接感受态细胞,筛选阳性菌株进行测序比对分析.结果显示:扩增获得的arcD基因序列长为915bp,克隆得到arcD基因的阳性转化子;生物信息学分析表明:arcD蛋白属于跨膜蛋白,无信号肽序列;LM5567的arcD基因核苷酸序列与02-6680株(4b,奶酪,加拿大)相似性99.9％,与10-0811株(1/2b,螃蟹,加拿大)相似性99.7％,与10-0809株(4b,粪便,加拿大)、81-0558株(4b,脑脊髓液,加拿大)、02-1103株、02-1792(4b,奶酪,加拿大)和81-0861株(4b,卷心菜,加拿大)相似性均为100％.LM5567arcD基因编码的氨基酸序列与上述菌株相似性为89.4％ ～89.9％.本实验成功克隆了arcD基因,为进一步探究arcD基因的功能奠定了基础.