草鱼jam-a分子在胚胎幼鱼期及受GCRV感染PSF细胞的表达分析

草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)可引发草鱼(Ctenopharyngodon idellus)出血病,导致高死亡率.草鱼吻端成纤维细胞(Grass carp snout fibroblast cells,PSF)是GCRV的敏感细胞系.JAM-A (Junctional adhesion molecule A)为免疫球蛋白超家族成员,是多种病毒的细胞受体.本研究在前期克隆到草鱼3种jam-a基因,命名为gcjam-a1,gcjam-a2和gcjam-a3.在获取ORF序列的基础上,利用qRT-PCR分析了3种gcjam-a在草鱼胚胎及幼鱼不同发育时期及PSF细胞中受GCRV(GD108株)感染前后的表达模式.结果 显示,检测的13个胚胎及幼鱼发育时期中,gcjam-a1在未受精卵中高表达,在受精卵至出膜前的胚胎表达水平均较低;从出膜后1～3 d表达量开始上升;出膜6～15 d均呈高水平表达.gcjam-a2与gcjam-a3在草鱼胚胎及幼鱼发育各阶段表达水平较低.在无病毒感染的PSF细胞中,gcjam-a只有少量表达.受GCRV-GD108感染后,病毒S7基因在PSF细胞中的拷贝数随时间呈显著上调趋势,gcjam-a的表达量也有不同程度的上调,mRNA上调水平为gcjam-a1 ＞gcjam-a2＞gcjam-a3.本研究证实了3种gcjam-a基因在PSF细胞中的表达均与GCRV-GD108感染相关,其中,gcjam-a1的表达水平受GCRV-GD108感染影响最大,同时,它在孵化出膜后表达上升,推测它可能与病毒的感染更相关.gcjam-a1可作为下一步GCRV与宿主互作研究中的候选分子.