凡纳滨对虾LvRab5B蛋白与IHHNV病毒蛋白的互作
Journal of Fisheries of China（2018）
摘要
为了探究LvRab5B蛋白在凡纳滨对虾抗病毒感染中的作用,实验分别构建了Lv-Rab5B蛋白在昆虫和酵母细胞中的融合表达载体,将不同的载体导入不同的细胞中,利用免疫荧光和酵母双杂交的方法研究了LvRab5B蛋白在昆虫细胞中的表达以及LvRab5B蛋白与病毒IHHNV之间的互作关系;通过qRT-PCR方法研究了该蛋白在健康对虾不同组织中的表达情况以及凡纳滨对虾分别感染IHHNV和WSSV后不同时间点的相对表达量.结果显示,LvRab5B基因融合蛋白能够在昆虫细胞中表达;LvRab5B蛋白与IH-HNV病毒衣壳蛋白CP无相互作用,而与非结构蛋白NS1相互作用明显,与非结构蛋白NS2作用较弱.qRT-PCR结果显示,LvRab5B基因在凡纳滨对虾心脏、鳃腺、肠道、胃、肝胰脏和肌肉中都表达,在肠道中表达量最高,肝胰脏次之;LvRab5B蛋白在凡纳滨对虾机体感染病毒前后的表达情况不同,感染初期表达降低,随后迅速上升,末期下降.研究表明,LvRab5B基因参与凡纳滨对虾抵抗IHHNV和WSSV病毒的先天免疫过程,为进一步研究LvRab5B蛋白在对虾机体中的免疫功能及作用机制奠定了基础.
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