团头鲂促肾上腺皮质激素释放激素受体基因序列特征及表达分析

促肾上腺皮质激素释放激素受体(corticotropin-releasing hormone receptor, CRHR)是鱼类下丘脑–垂体–头肾调控轴上的重要应激调节因子。本研究通过 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术成功克隆出团头鲂(Megalobrama amblycephala) CRHR1 mRNA全长序列,应用生物信息学方法对其序列特征进行解析；同时采用荧光定量PCR技术分析了团头鲂CRHR1的组织分布图谱及外源性皮质醇注射模拟应激处理下团头鲂CRHR1 mRNA的表达变化。研究结果表明, CRHR1 mRNA序列开放阅读框(open reading frame, ORF)为1290 bp,编码429个氨基酸。团头鲂CRHR1氨基酸序列与鲤科鱼类的 CRHR1氨基酸序列同源性最高；该受体具有7次横跨膜结构和氨基端激素受体结构域。CRHR1在垂体中表达量最高,其次为下丘脑,在心脏、肝、脾等组织中表达丰度较低。经外源性皮质醇注射后,实验组血糖和血清皮质醇显著高于对照组,在处理2 h后达到峰值；实验组血清ACTH水平与对照组差异总体不显著,但呈现先升高后下降。应激处理后, CRHR1转录水平在4种组织中的表达变化存在差异；垂体中CRHR1在早期出现明显的表达抑制,在下丘脑中则呈现先缓慢升高后缓慢下降的趋势,而心脏和头肾中 CRHR1在早期则表现出表达迅速上调而后缓慢下降的趋势。本研究进一步丰富了 CRHR 在鱼类研究方面的基础资料,为鱼类应激调控提供了理论基础。