植物病原真菌广谱拮抗菌M29的筛选、鉴定及其抑菌机制

[目的]从蚯蚓粪中筛选广谱拮抗植物病菌的细菌并应用于生物防治,同时对它的抑菌机制进行初步探究.[方法]以10种病原真菌为靶菌,采用梯度稀释法和平板对峙法对蚯蚓粪中的拮抗菌进行初筛和复筛,并结合形态学特征、生理生化指标和16S rDNA基因序列对拮抗菌进行初步鉴定;采用生长速率法测定菌株及其脂肽类提取物的拮抗活性;通过平板倒扣法测定菌株产挥发性物质(VOCs)抑制病原菌菌丝生长的效果.[结果]筛选出拮抗水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、桃溃疡病菌和灰霉病菌的拮抗细菌分别为12、21、3和3株.其中,菌株M29(GenBank登录号:KU870670)能够有效且强烈地抑制灰霉等10种病原菌,对水稻纹枯病菌、大丽轮枝病菌和灰霉病菌的抑制率分别高达95％、91％和89％.结合形态学特征、生理生化指标和16S rDNA基因序列分析,初步鉴定菌株M29为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).菌株M29产生的脂肽类粗提取物对桃溃疡病菌的抑制率高达97％;产生的VOCs对大丽轮枝病菌的抑制率达65％,且VOCs不仅能明显抑制烟曲霉孢子的生长,还可抑制多种病原菌色素的产生.[结论]枯草芽孢杆菌M29菌株具有较高的广谱拮抗病原真菌的能力,在植物真菌病害生物防控中具有潜在的应用价值.