7型猪链球菌免疫相关性蛋白乳酸脱氢酶的筛选与分析

[目的]快速高效筛选7型猪链球菌免疫原性蛋白,以作为猪链球菌疫苗的候选分子.[方法]以7型猪链球菌分离株WH07为样品,应用免疫蛋白质组学技术建立了WH07株全菌蛋白的双向电泳体系,并利用蛋白质免疫杂交技术筛选免疫原性蛋白.[结果]获得了分辨率及重复性良好的双向电泳(2-DE)图谱,且得到3个具有免疫反应性的蛋白质点,经质谱鉴定其归属于1个蛋白,即乳酸脱氢酶(LDH).生物信息学预测表明,该蛋白分子质量为35 420 ku,理论等电点为5.05,具有2个跨膜区,分别位于第10～28位和第110～129位,并根据预测分析结果成功模拟了蛋白质的三级结构.[结论]从猪链球菌WH07菌株中筛选并鉴定了1个具有免疫原性的蛋白,即乳酸脱氢酶,并模拟了其三级结构.