羊踯躅psy基因的克隆及表达分析

为了研究羊踯躅psy基因的功能及其在花瓣着色中的分子机理,以羊踯躅花瓣的cDNA为模板,采用RT-PCR和RACE方法克隆得到1638bp的psy基因全长cDNA序列,命名为RmPSY (GenKank登录号为KX230461).序列分析表明,RmPSY开放阅读框为1296bp,编码432个氨基酸.羊踯躅PSY为亲水性的不稳定蛋白,无信号肽,属于非分泌蛋白;预测的蛋白质分子量48.91kD,等电点为8.78.RmPSY与GenBank中收录的其他植物PSY蛋白氨基酸的相似性达到81％.构建系统进化树,结果显示羊踯躅PSY与葡萄PSY蛋白的亲缘关系最近.实时荧光定量PCR结果显示,该基因在羊踯躅花发育的不同阶段均有表达,在花蕾期表达量较低,在初开期表达量最高,盛开期表达量有所下降.试验结果为进一步揭示RmPSY基因参与调控羊踯躅花色形成的分子机制奠定基础.